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    PCR實(shí)驗室平面布局要點(diǎn)分析

    發(fā)布時(shí)間: 2023-02-21  點(diǎn)擊次數: 546次


    PCR技術(shù)憑借特異性強、靈敏度高、對檢測樣品要求低、方便快捷等優(yōu)點(diǎn),廣泛應用于各種臨床診斷。PCR實(shí)驗室是承載PCR技術(shù)應用的設施,實(shí)驗室的合理設計才能確保檢測結果的可靠性,博泰小編帶大家了解PCR實(shí)驗室平面布局相關(guān)知識。

     

    一、PCR實(shí)驗室平面布局要求

     

    1、如果采用實(shí)時(shí)熒光PCR法,則擴增區和分析區可以合并為一個(gè)區。

     

    2、如果樣本在擴增之前需要粉碎處理,則需要增加一個(gè)區域用于樣品的粉碎。

     

    3、PCR實(shí)驗室一般由試劑儲備區、標本制備區、擴增區、擴增分析區4個(gè)區域組成。

     

    4、如果采用全自動(dòng)化PCR分析儀,則標本制備區、擴增區和分析區可以合并為一個(gè)區。

     

    二、實(shí)驗室功能與設備設計要點(diǎn)分析

     

    1、試劑儲備區

    該區域主要完成試劑和主反應混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運送到該區域的試劑和材料不應經(jīng)過(guò)其他區域,試劑和原材料應在本區內儲存和制備。本區域的氣壓應相對外界保持正壓。該區域的設備主要是冰箱、天平、混勻器、低速離心機、加樣器、可移動(dòng)紫外燈等。

     

    2、標本制備區

    該區域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存、樣本加入擴增反應管和測定DNA的合成。樣本應直接運送至該區并儲存在本區內,不得經(jīng)過(guò)其他區域。對于氣流壓力的控制,由于在本區內加樣操作可能產(chǎn)生氣溶膠,為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染,本區應對外界保持負壓;同時(shí)本區相對于擴增反應混合物配制和擴增區以及擴增產(chǎn)物分析區為正壓,以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染。

     

    3、擴增區

    該區域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外,反應混合液制備成反應混合液和已制備的DNA模板的加入等也可在本區內進(jìn)行。對于氣流壓力的控制,相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應在超凈臺內進(jìn)行。

     

    4、分析區

    該區域的功能是擴增產(chǎn)物的分析。該區域可能會(huì )用到某些可致基因突變的有毒物質(zhì),應特別注意實(shí)驗人員的安全防護。對于氣流壓力的控制,該區域是PCR實(shí)驗的最后一步,相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動(dòng)。



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